作用不同：自动变速箱油是专用的，它有两方面的作用：对行星齿轮组起到润滑、散热、清洁的作用，另一方面是作为液压传动的媒介——这一点是手动变速箱油所不具有的。

性质差别：由于作用不同，手动变速箱油和自动变速箱油黏度有明显差异，手动变速箱油较为黏稠，自动变速箱油的主要作用是起到液压传动，因此流动性非常好，抗泡性能和空气释放性能也比手动变速箱油的要求更严。
颜色差别：手动变速箱油大部分是浅黄色（新油），使用之后颜色逐渐变深变黑。自动变速箱油大部分是鲜红色（也有少数是浅黄色），使用后颜色逐渐变深，变成暗红色、红褐色。

手动变速箱油
手动变速箱油属于车用齿轮油，车用齿轮油用于汽车上的正、伞齿轮,变速箱和转向器、后桥差速器等齿轮的润滑。注意：车用齿轮油不能和工业齿轮油搞混，两类齿轮油不能混用代用。手动变速箱油和自动变速箱油也不能混用代用。

车用齿轮油的选用分两步，首先是黏度，黏度要根据汽车说明书的要求选择合适的号数。确定黏度后，根据要求选择合适的GL级别，例如后桥齿轮和变速箱齿轮油的黏度和API GL级别都应该按照汽车说明书的要求选用，不能随意换用。

对于手动变速箱，大多数车使用专门的车用齿轮油，也有使用机油的，极少数的使用ATF油，但是具体应该选用哪种油，前提还是必须要遵循汽车说明书的要求，不能自己随意用。